بررسی ایجاد گیاه تراریخته زودگلده آرابیدوپسیس و اطلسی به روش خاموش کردن ژن clf از طریق rna silencing

یکی از دغدغه های محقّقان جهت ایجاد صفات برتر در موجودات زنده انتخاب و به کارگیری روش هایی است که علیرغم کارایی بالا، کمترین آثار مخرّب روی موجودات داشته باشند. امروزه rna silencing به عنوان یکی از تکنیک های کارآمد و هوشمند، برای دستیابی به اهداف ژنتیک معکوس و یا ایجاد فنوتیپ برتر، در بین محقّقان طرفداران فراوانی پیدا کرده است. از جنبه های کاربردی این تکنیک، می توان به تولید گیاهانی با ارزش اقتصادی بالا اشاره کرد. از آنجا که یکی از مشکلات عمده ی کشاورزی در برخی مناطق زراعی، وجود شرایط محیطی نامساعد برای رشد گیاه می باشد، لذا ایجاد گیاهان سازگار با این شرایط از اهمّیّت خاصّی برخوردار است. مثلاً در مناطقی با فصل رویشی کوتاه، ایجاد گیاهان زودگلده باعث در امان ماندن آنها از شرایط نامساعد می گردد. حتی در مورد گیاهان زینتی و دارویی هم ایجاد چنین صفتی می تواند کاربردهای اقتصادی فراوانی داشته باشد. بنابراین در این تحقیق به منظور تسریع گلدهی در گیاهان آرابیدوپسیس و اطلسی از تکنیک rna silencing برای مهار بیان ژن clf (ژنی که با مهار بیان ft توسّط متیلاسیون هیستون کروماتین، باعث مهار گلدهی می گردد) استفاده شد. گیاه اطلسی به دلیل داشتن جنبه ی تزیینی و آرابیدوپسیس به عنوان یک گیاه مدل، هدف مناسبی برای این منظور می باشند. ابتدا، برای تولید ساختار های سنجاق سری (hairpin)، قطعه ای از ژن clf آرابیدوپسیس تالیانا به روش pcr تکثیر و در دو مرحله، در دو جهت سنس و آنتی سنس در وکتور pfgc5941 همسانه سازی شد. در مرحله ی بعد، وکتور حاصل به روش آگروباکتریوم، به گیاهان آرابیدوپسیس و اطلسی انتقال یافت. بعد از استخراج dnaی ژنومی از گیاهان تراریخت نسل اوّل، حضور سازه ی rnai در آنها به کمک واکنش pcr با پرایمرهای سنس و آنتی سنس تایید گردید. همانطور که انتظار می رفت، گلدهی در گیاهان تراریخت آرابیدوپسیس زودتر از گیاهان طبیعی صورت گرفت.